2006年12月15日,黃海所陳松林研究員主持的青島市首批科技將才計(jì)劃項(xiàng)目“重要海水養(yǎng)殖魚(yú)類抗病和性別相關(guān)基因克隆及分子育種技術(shù)”通過(guò)了青島市科技局組織的專家驗(yàn)收。驗(yàn)收專家組由中國(guó)海洋大學(xué)、中科院海洋研究所、黃海水產(chǎn)研究所和青島市科技局等單位的專家組成。
該項(xiàng)目經(jīng)過(guò)兩年的科技攻關(guān),主要取得了以下成果:
1. 采用文庫(kù)篩選和同源克隆的方法從真鯛、牙鲆和大菱鲆免疫組織中克隆了抗菌肽hepcidin基因、天然抗性相關(guān)巨嗜蛋白(Nramp)基因、MHC I和II型基因等抗病相關(guān)功能基因20多個(gè)。向美國(guó)GenBank提交基因序列200多條。為海水魚(yú)類抗病機(jī)理研究及抗病基因標(biāo)記篩選提供了基因資源。
2. 篩選到牙鲆和大菱鲆抗病個(gè)體300多尾,建立了牙鲆和大菱鲆抗病基礎(chǔ)群體;研究了MHC IIB基因的分子多態(tài)性,篩選到13種MHC IIB基因型,研究了MHC IIB基因多態(tài)性與牙鲆抗病力的關(guān)系,初步篩選出抗病相關(guān)MHC基因標(biāo)記2個(gè),疾病敏感相關(guān)MHC基因標(biāo)記1個(gè)。為魚(yú)類抗病分子育種研究開(kāi)辟了新的技術(shù)途徑。
3. 首次篩選到半滑舌鰨雌性特異AFLP分子標(biāo)記7個(gè),獲得了半滑舌鰨雌性特異DNA片段的核苷酸序列;建立了半滑舌鰨遺傳性別鑒定的PCR技術(shù),為半滑舌鰨性別控制和全雌育種研究提供了有效的技術(shù)手段。
4. 克隆了半滑舌鰨性別相關(guān)功能基因-芳香化酶P450aromA基因,發(fā)現(xiàn)該基因只在性腺中特異表達(dá),且在雌性卵巢中的表達(dá)明顯高于雄性精巢中的表達(dá)。
5. 從真鯛和大菱鲆cDNA文庫(kù)中篩選到微衛(wèi)星序列80條和81條,其中具有多態(tài)性的微衛(wèi)星標(biāo)記分別為11個(gè)和12個(gè)。
項(xiàng)目執(zhí)行期間共申報(bào)國(guó)家發(fā)明專利4項(xiàng),發(fā)表論文32篇,其中SCI論文20篇,EI論文4篇。建立了一支由6人組成的創(chuàng)新團(tuán)隊(duì),2006年獲批山東省泰山學(xué)者“水產(chǎn)種質(zhì)資源與生物技術(shù)”崗位。
(科研處供稿)